在這里，公討論溶液物質(zhì)的光子產(chǎn)額的測定技術(shù)。人測定光子產(chǎn)額的歷史看，要消除全部誤差是非常難的，而且也不存在一種理想的測定方法。因此，為了鑒定每種化合物的光子產(chǎn)額就需要許多的獨立方法。
1、光散射法
作為理想散射的物質(zhì)，當它被光照射時(shí)釋放所有的光子而不改變其波長(cháng)。對于實(shí)際應用，則可把這物質(zhì)的光子產(chǎn)額視為等于1。
具體研究了兩種散射源即噴涂氧化鎂的玻璃和肝糖膠體溶液。
瓦維洛夫首先建議噴除氧化鎂的玻璃作為校準液體化合物的光子產(chǎn)額的參考材料。氧化鎂散射體作為基準材料的不足之點(diǎn)在于：
（1） 氧化鎂涂層老化迅速；
（2） 其反射比與涂層的制備法及其厚度有關(guān)；
（3） 其反射比在紫外區明顯下降。
此外，在將固體表面的反射與液池中熒光化合物的發(fā)射作比較時(shí)，可能出現一些問(wèn)題。要特別注意標準與試樣之間的偏振變化，心及液池里的內反射。由于反射的差異，可能造成高達20%的誤差。為了避免標準單色儀這類(lèi)問(wèn)題，應使用若丹明B作為探測系統。雖然可對這么多的變量做校正，但是做起來(lái)也相當麻煩。對于光密溶液，膠體溶液或許比基準材料好些。
這個(gè)技術(shù)的最大吸引力是，許多的市售熒光計勿須進(jìn)行改裝即可使用。在比較散射標準和熒光試樣的信號時(shí)，主要考慮的修正因子是：
（1） 探測系統的光譜響應度的校正；
（2） 標準與試樣之間偏振差異的校正；
（3） 標準與試樣之間折射率和光學(xué)密度的差異；
在選擇光散射標準時(shí)必須考慮到：
（1） 可能出現的光吸收和熒光污染；用瑞利定律吸收度Xλ=const
（2） 測定散射標準和熒光試樣的吸收度的適合手段。
（3） 散射溶液的穩定性，即肝糖等溶液在貯存過(guò)程中會(huì )發(fā)生水解。
2、幾何條件的絕對評估
這種方法對于光密度液是有價(jià)值的，但對稀淡溶液很少令人滿(mǎn)意。在液池位置引入量子計數器或量子探測器直接測量激發(fā)強度，而不用光散射器。該方法的優(yōu)點(diǎn)是不測量散射器的反射性質(zhì)。雖然這種方法離不開(kāi)量子計數器或探測器，但在市場(chǎng)上可以得到合適的配置。使用化學(xué)感光計改進(jìn)了這一方法。
改進(jìn)法的原理是，用化學(xué)感光計測定入射在試樣液池上的輻通量。當試樣被相同的化學(xué)感光計幾乎完全包圍時(shí)，放好試樣進(jìn)行輻射，以確保發(fā)射光的探測。這種技術(shù)已經(jīng)用于幾臺市售熒光光譜儀和分光光度計上。但需要改進(jìn)試樣艙。
在一個(gè)測量系統中使用了激光源。做了一個(gè)細小的改進(jìn)，便使得從液池前面和背面的很小面積上發(fā)射的光也不會(huì )被感光計遮蓋住。
該法的重要改進(jìn)是，將一個(gè)積分球作為探測系統的一部分。用標準光源校準積分球、單色儀和光電探測器這一組合系統，除了較新的市售儀器之外，在改進(jìn)過(guò)程中遇到了一些困難。
3、量熱計法
量熱計測量術(shù)與光學(xué)技術(shù)的固有誤差沒(méi)有關(guān)系，因此，它是測定光子產(chǎn)額另外一種非常有用的手段。其原理是，在無(wú)熒光的標準溶液和熒光試樣（光學(xué)密度非常相近）被照射期間，比較它們的溫度（或體積）變化。由于無(wú)熒光標準液的量子效率為零，則兩種溶液的溫度變化率給出了吸收能量與試樣輻射過(guò)程損失的能量之比。也就是光子產(chǎn)額的補充。但是量熱計在熒光測定中也遇到一些困難：
（1） 探測器的靈敏度相對低，因此必須使用濃度相對高的溶液。
（2） 要選擇合適的光源。需要譜線(xiàn)分立的穩定性高的強光源，而且要紅外輻射弱。或許激光是合適的。
（3） 需要特殊的試樣艙，以消除環(huán)境溫度的影響。
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